技術名稱 利用可攜式定序裝置Oxford Nanopore MinION及雙條碼策略進行高通量且精準的多基因位點序列分型
計畫單位 財團法人國家衛生研究院
計畫主持人 廖玉潔
技術簡介
以雙條碼的實驗設計,利用ONT MinION定序平台,搭配nanoMLST的分析程序,資料會從產出後直接進行分析,轉化成序列後篩選其品質並將樣本利用雙條碼的標誌進行歸類,再利用序列比對方式進行校正,最終達到多樣本自動化多基因位點序列分型(MLST),此法能降低成本,可應用於各式全長基因的定序服務。
科學突破性
以抗藥性金黃色葡萄球菌為模型所開發的nanoMLST技術,可同時針對96株菌進行分析,共定序出672個全長(平均1,300 bp)的等位基因(alleles),其中359條基因經驗證與Sanger的產出型別完全一致,nanoMLST能自動化完成96株菌的MLST,是目前以ONT進行高通量MLST唯一成功的案例。
產業應用性
nanoMLST是以MRSA為模型所開發並經驗證的新技術,對於流行病學研究及醫院感染控制將提供幫助,目前至少有110種微生物需要MLST,若將nanoMLST技術延伸適用在這些微生物,藉由定序平台的普及以及成本的大幅降低,可使醫院感控監測更全面,對於養殖業、食品安全及其他公共衛生領域也能有所幫助。
關鍵字 多基因位點序列分型 次世代定序 抗藥性金黃色葡萄球菌 高通量 目標區間定序 雙條碼 奈米孔測序技術 長讀長 高成本效益 快速精準分型
備註
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  • 吳漢傑
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